Western Blot wurde durchgeführt, um die Puma Platform Suede Expressionsniveaus für anti-apoptotische Mitglieder der Bcl-2-Proteinfamilie zu bestimmen. Bemerkenswerterweise sind Bcl-2 und Bcl-xL in der Mehrzahl der analysierten GBM-Zelllinien stark exprimiert, nicht jedoch in Mcl-1. (D) Die Wiederherstellung der intrinsischen Apoptose sensibilisiert EGFR / EGFRvIII-exprimierende GBM-Zellen für eine auf EGFR gerichtete Therapie. U87MG-EGFR- und U87MGEGFRvIII-Zellen wurden mit Iressa allein (0-100 uM), 2-MA A3 (einem Bcl-2 / Bcl-xL-Inhibitor und einem starken Apoptose-Induktor; 0-100 uM) allein und in Kombination mit behandelt Molverhältnis von 1: 2 (Iressa: 2-MA A3). Achtundvierzig Stunden nach der Behandlung wurden die Zellüberlebensraten bestimmt und der CI unter Verwendung der Median-Effekt-Analyse berechnet, wie wir zuvor beschrieben haben [9; 34].

CI-Werte: CI 1,0, antagonistische Wirkung. Die Kombinationsbehandlung zeigte synergistische Abtötungseffekte in beiden Zelllinien, was durch niedrige CI-Werte angezeigt wird. Darüber hinaus fanden wir, dass die meisten analysierten GBM-Zelllinien hohe Konzentrationen an anti-apoptotischen Mitgliedern der Bcl-2-Proteinfamilie, Bcl-2 und Puma Sneaker Damen Bcl-2, exprimieren Bcl-xL, aber nicht Mcl-1 (Fig. 6c).

Diese Ergebnisse zeigen, dass die gleichzeitige Hemmung der kinaseunabhängigen Funktion von EGFR / EGFRvIII unter Verwendung eines Bcl-2 / Bcl-xL-Inhibitors und der kinaseabhängigen Aktivität durch EGFR-Kinase-Inhibitoren zu synergistischen therapeutischen Wirkungen in GBM-Zellen führen kann EGFR und EGFRvIII sind ein Hauptmerkmal Arbeitsschuhe Puma von GBM. Obwohl beide Rezeptoren mit der Resistenz von GBM gegen Chemotherapie in Verbindung gebracht wurden, sind die Mechanismen, die dieser Assoziation zugrunde liegen, immer noch unklar. Unsere Ergebnisse in dieser Studie liefern Hinweise darauf, dass sowohl EGFR als auch EGFRvIII die intrinsische Mitochondrien-vermittelte Apoptose negativ regulieren, indem sie an PUMA binden, ein proapoptotisches Protein, das in der Mehrzahl der GBM stark exprimiert wird.

Die Ergebnisse dieser Studie, die zeigen, dass GBMs, von denen bekannt ist, dass sie hochgradig therapieresistent sind, um hohe Spiegel des proapoptotischen Proteins PUMA zu exprimieren, sind paradox. Um einen Einblick Puma Arbeitsschuhe in dieses Paradoxon zu erhalten, untersuchten wir EGFR und EGFRvIII, die in GBM ähnlich wie PUMA häufig überexprimiert werden, und stellten fest, dass beide Wege umgekehrt mit der apoptotischen Reaktion von GBM-Zellen verknüpft sind. Diese Ergebnisse lassen die Spekulation zu, dass eine Untergruppe von GBM (34%) die Expression von EGFR / EGFRvIII heraufregulieren kann, um PUMA negativ zu regulieren und damit einer therapieinduzierten Apoptose zu entgehen.

Unsere Ergebnisse zeigten, dass Iressa, ein auf EGFR gerichteter Tyrosinkinaseinhibitor, die Wechselwirkung zwischen EGFR / EGFRvIII und PUMA nicht unterbricht, was darauf hindeutet, dass diese kinaseunabhängige antiapoptotische Aktivität ein wichtiger Mechanismus sein könnte, der der begrenzten klinischen Wirksamkeit von EGFR zugrunde liegt. Gezielte Therapie. Diese Beobachtungen legen auch nahe, dass eine höhere therapeutische Wirksamkeit erzielt werden kann, indem sowohl kinaseabhängige als auch -unabhängige Funktionen von EGFR angestrebt werden. Zur Untermauerung dieser Prämisse zeigten unsere Daten, dass die Nachahmung der proapoptotischen Aktivität von PUMA unter Verwendung eines Bcl-2 / Bcl-xL-Inhibitors sowohl EGFR- als auch EGFRvIII-exprimierende GBM-Zellen gegen Iressa sensibilisierte und dass die meisten von uns analysierten GBM-Zelllinien hohe Konzentrationen an Bcl exprimierten. 2 und Bcl-xL.

Um die interindividuellen Wechselwirkungen Fenty Puma zwischen individuell erkennbaren Jaguaren (Panthern onca) und einfarbigen Pumas (Puma concolor) zu untersuchen, haben wir umfangreiche Kamerafallenuntersuchungen durchgeführt. Zeitgesteuerte Standortdaten aus einem Netzwerk von 119 Fangstationen im Cockscomb Basin von Belize liefern den ersten Beweis für eine interspezifische Vermeidung, die auf intraspezifische Wechselwirkungen zwischen Jaguaren abgestellt ist. Das Einfangen von Kameras hat gegenüber der Radiotelemetrie den Vorteil, dass Daten über das gesamte Spektrum von Personen innerhalb des Untersuchungsgebiets bereitgestellt werden können. Die 23 einzeln identifizierten männlichen Jaguare zeigten ein hohes Maß an Überlappung in den Bereichen, wobei im selben Monat bis zu 5 verschiedene Männer am selben Ort gefangen wurden.